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DAB顯色試劑盒(20×)
保存條件 Store at –20℃.DAB,即3,3’-二氨基聯(lián)苯胺(3,3’-diaminobenzidine)是辣根過(guò)氧化物酶(Peroxidase)的常用生色底物,在過(guò)氧化氫的存在下失去電子而呈現(xiàn)出顏色變化,形成淺棕色不溶性產(chǎn)物。用于檢測(cè)過(guò)氧化物酶的活性,它靈敏度高,特異性好,是HRP結(jié)合物常用的底物,常在免疫組化,原位雜交,Western?blot等膜顯色或檢測(cè)細(xì)胞或組織內(nèi)源性的過(guò)氧化物酶中應(yīng)用廣泛。
DAB顯色試劑盒(20×)
用法:
1. 臨用前配制 10 mL 1×DAB 顯色工作液:將 0.5 mL 20× DAB 顯色液 A 加入 9 mL 1×PBS 中并渦旋混勻。向 DAB / PBS 混合物中加入0.5 mL 20×DAB顯色液B渦旋混合均勻。 可以根據(jù)需要按比例縮放體積。 注意:不要使用含有Sodium Azide的緩沖液,Sodium Azide是一種HRP抑制劑。
2. 在樣品的最后一次洗滌完畢后,去除洗滌液,加入足夠 的 DAB 顯色工作液,確保能充分覆蓋樣品。室溫避光孵育 3-30 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間,直至顯色達(dá)到預(yù)期深淺。免疫印跡實(shí)驗(yàn),應(yīng)保證樣品在一個(gè)足夠多的染色液中且能被自由晃動(dòng)。
3. 去除 DAB 染色工作液,用 PBS 沖洗樣品幾次以中止顯色反應(yīng)。對(duì)于用顯微鏡觀察的細(xì)胞或組織樣品,可復(fù)染樣品(可選)并安裝在水性封固介質(zhì)中?;蛘撸梢詫悠访撍惭b在有機(jī)封固劑中。免疫印跡實(shí)驗(yàn),可將樣品用水沖洗,風(fēng)干,然后在室溫下儲(chǔ)存。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸:
-20℃避光密閉保存,一年有效。避免反復(fù)凍融。
2~8℃運(yùn)輸,在途時(shí)間5天對(duì)試劑無(wú)影響。
注意事項(xiàng)
1. DAB對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
2. 顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,新鮮配制的工作液應(yīng)為無(wú)色或淺棕色,如顏色過(guò)深,請(qǐng)勿使用。??
3. 顯色時(shí)間嚴(yán)格控制,根據(jù)情況調(diào)整,以免顯色過(guò)度。固相膜顯色數(shù)小時(shí)后即會(huì)褪色,不能Permanent存在。
4. 請(qǐng)將沾有DAB顯色液A的容器等放在含有3% KMnO4,2% NaHCO3?的溶液浸泡3h,以減少污染。?
5. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
6. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。